確保實(shí)驗動(dòng)物的福利一個(gè)重要部分是動(dòng)物與實(shí)驗人員之間的正確互動(dòng)。對動(dòng)物的不正確處理會(huì )造成壓力，進(jìn)而影響研究成果。因此，實(shí)驗人員正確處理動(dòng)物并了解不同技術(shù)對研究成果的影響非常重要。在本文中，我們將通過(guò)一個(gè)研究實(shí)例來(lái)探討不同技術(shù)的影響、利弊，以及這將如何影響您的研究。
不同處理技術(shù)的利弊
有許多不同的操作處理技術(shù)，但有三種在小鼠研究中最為普遍。它們分別是管道式處理、用手捧起和從尾根部拎起動(dòng)物。雖然抓尾巴是過(guò)去常用的方法，但有可能誘發(fā)嚙齒類(lèi)動(dòng)物的焦慮。此外，使用抓尾巴的方法而不抓尾巴根部或沒(méi)有支撐小鼠的身體也會(huì )引起不適。
對于小鼠，可以使用管道處理法將其引導到塑料管道中。這種方法的主要優(yōu)點(diǎn)是管道可以放在籠子里。這使動(dòng)物熟悉該物體，對物體的習慣會(huì )減少壓力，操作更容易。管道式處理是動(dòng)物在不同環(huán)境間移動(dòng)的好方法。不過(guò)，在管道中檢查動(dòng)物或進(jìn)行干預比較困難。
與使用尾巴處理相比，用手捧起，讓動(dòng)物坐在或走過(guò)張開(kāi)的手是一種可以減輕壓力的方法。在使用這種方法時(shí)，小鼠是不受約束的，這也是焦慮減少的原因。不過(guò)，這種方法需要小鼠熟悉操作者的雙手，這比讓動(dòng)物適應管道更耗費實(shí)驗者的時(shí)間。
總之，雖然存在許多技術(shù)，但重要的是要根據您的具體研究需要權衡利弊。了解減少焦慮對研究的益處和影響，并報告使用的方法以提高研究的可重復性，這一點(diǎn)非常重要。想了解更多信息？最近，我們舉辦了一次網(wǎng)絡(luò )研討會(huì ) ，更深入地解釋了在曠場(chǎng)和高架十字迷宮中處理對焦慮測試的影響。您可以點(diǎn)擊此處觀(guān)看該網(wǎng)絡(luò )研討會(huì )。
給大鼠撓癢如何改善您的研究？
我們討論過(guò)某些處理技巧如何減輕焦慮。對于大鼠，還有另一種減輕壓力的方法，那就是給大鼠撓癢。給大鼠撓癢是由Jaak Panksepp博士于1999年提出的。這種方法可以模擬老鼠自然產(chǎn)生的打斗行為。大鼠在被其它大鼠或人類(lèi)撓癢時(shí)還會(huì )發(fā)出許多積極的高音調聲音，這是一種積極情緒狀態(tài)的指標。
多年來(lái)，大鼠撓癢一直被用來(lái)減輕大鼠在被實(shí)驗者處理時(shí)的焦慮。通過(guò)撓癢，大鼠對觀(guān)察者的手的厭惡感會(huì )降低，在注射等程序后的壓力也會(huì )減少[1]。
來(lái)源：Gaskill實(shí)驗室
如何給老鼠撓癢？
給大鼠撓癢的工作原理是首先進(jìn)行背部接觸（這也是老鼠大多數游戲打斗的開(kāi)始方式），然后對大鼠用手鉗住。鉗住大鼠后，您要把大鼠抱起輕輕翻轉，讓它仰面朝天，并對他們的胸口處進(jìn)行撓癢。之后，松開(kāi)大鼠，重復這個(gè)動(dòng)作。研究表明，只要在進(jìn)行標記或注射等某些程序之前連續多天進(jìn)行撓癢，15 秒鐘的撓癢就足以讓老鼠從這項技術(shù)中獲益。值得注意的是，撓癢在動(dòng)物年幼且與人類(lèi)接觸不多時(shí)效果好。撓癢可以在大鼠和人類(lèi)之間建立聯(lián)系，如果大鼠已經(jīng)對人類(lèi)產(chǎn)生了厭惡感，那么撓癢實(shí)際上可能會(huì )產(chǎn)生負面影響。
撓癢可能聽(tīng)起來(lái)費時(shí)費力，但好處很多。被撓癢的老鼠不僅壓力較小，因此受應激的影響也較小，而且也更容易處理。這反過(guò)來(lái)又節省了時(shí)間，改善了動(dòng)物的福利。如果您想了解更多有關(guān)給大鼠撓癢的知識或學(xué)習如何給大鼠撓癢，我建議您觀(guān)看梅根-拉福萊特博士（Dr. Megan LaFollette）的網(wǎng)絡(luò )研討會(huì )。她更深入地解釋了給大鼠撓癢的方法和注意事項。
在社會(huì )環(huán)境中測試嚙齒動(dòng)物
大鼠和小鼠是社會(huì )性動(dòng)物。幸運的是，大多數實(shí)驗室嚙齒類(lèi)動(dòng)物在測試前后都會(huì )被社會(huì )化飼養。然而，我們發(fā)現越來(lái)越多的研究人員正在考慮在社會(huì )環(huán)境中進(jìn)行測試。使用軟件跟蹤多只動(dòng)物曾經(jīng)相當復雜，因此，諾達思的EthoVision XT 18版本（動(dòng)物運動(dòng)軌跡跟蹤系統的最新版本）包含一個(gè)改進(jìn)的社交互動(dòng)模塊。通過(guò)復雜的深度學(xué)習算法改進(jìn)了跟蹤功能，這樣就能減少錯誤，并始終跟蹤到正確的動(dòng)物。這項新的創(chuàng )新不僅能讓研究人員測試小鼠的社交互動(dòng)，還能在社交環(huán)境中測試新奇物體或其他測試。EthoVision XT 18版本即將發(fā)布，敬請期待！
熟悉實(shí)驗者對小鼠行為的影響
最近進(jìn)行了一項研究，研究了（除其他因素外）熟悉實(shí)驗者對慢性疼痛癥狀的影響[2]。Segelcke等人將幾組小鼠暴露在不同的飼養環(huán)境和其他條件下。他們通過(guò)糞便皮質(zhì)酮水平測量了大鼠的壓力水平，并在行為和步態(tài)觀(guān)察中將其與小鼠的生理能力相關(guān)聯(lián)。
通過(guò)將小鼠暴露在戴手套的手上，實(shí)驗者熟悉了它們。讓小鼠探索這只手，并爬到手上。每周兩次，每只小鼠每次5分鐘。研究人員在大部分操作中都使用了前面提到的用手捧起方法。不過(guò)，在將小鼠放入迷宮或圍欄時(shí)，則使用了從尾根部拎起。
通過(guò)使用動(dòng)物步態(tài)分析系統(CatWalk XT)進(jìn)行步態(tài)分析，研究人員發(fā)現，熟悉實(shí)驗者的小鼠步態(tài)變化不太明顯。 此外，Segelcke 等人還發(fā)現，與不熟悉實(shí)驗者的小鼠相比，熟悉實(shí)驗者的小鼠會(huì )對某些行為測試的結果產(chǎn)生影響。熟悉的小鼠在進(jìn)行高架迷宮和懸尾試驗等行為測試時(shí)壓力較小。
總之，正確的操作技術(shù)對于確保實(shí)驗動(dòng)物的福利非常重要。根據研究需要選擇合適的技術(shù)可以改善動(dòng)物福利，提高研究質(zhì)量。實(shí)驗者的處理和熟悉類(lèi)型將對行為測試產(chǎn)生影響，因此在進(jìn)行行為研究時(shí)，考慮和記錄這些因素非常重要。
參考文獻
1. Cloutier, S.; LaFollette, M.R.; Gaskill, B.N.; Panksepp, J.; Newberry, R.C. Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats. JoVE J. Vis. Exp. 2018, e57190
2. Segelcke, D.; Talbot, S.R.; Palme, R.; La Porta, C.; Pogatzki-Zahn, E.; Bleich, A.; Tappe-Theodor, A. Experimenter Familiarization Is a Crucial Prerequisite for Assessing Behavioral Outcomes and Reduces Stress in Mice Not Only under Chronic Pain Conditions. Sci. Rep. 2023, 13, 2289
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